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第192章 遇到困难,找江河(1 / 4)

南医大这边。

江河不语,只是一味做项目。

实验室中,连易向晚都不讲笑话了,足以见得事情的严重程度。

这样也挺好,效率很高。

irna早筛项目完成的进度条,正在迅速向前推进:

15 18…… 21……

要是追女生也有这么明确的进度条就好了。

然而,科研不可能总是一帆风顺,尤其江河不在的时候。

这日下午,王教授坐镇推进逆转录和pcr扩增环节。

问题出现:

荧光定量pcr的扩增曲线呈现出杂乱状态,而更糟糕的是溶解曲线,出现了好几个杂乱的双峰。

蔡卓群叹了口气:「非特异性扩增严重,有引物二聚体。」

陈浩在旁,也稍微显得有些失落。

基本上,做出这种曲线,就意味着这批数据全废了

蔡卓群:「王教授,您看这怎麽处理?」

王晓晴分析:「茎环结构的自由能太低,导致构象过于稳定,如果在现有的反应体系下,常规的提高退火温度已经没用了。」

蔡卓群点点头:「那我们需要重新设计引物序列吗? 可是如果要重新设计,得耽误很多时间。」

王晓晴皱着眉头。

她一时间也没有什么好的办法。

第一反应是通过调整体系的镁离子浓度,或者重新设计巢式pcr的引物结构来从根本上解决非特异性结合。

但似乎,都需要耗费大量的时间去重新摸索。

就在这时。

江河回来了。

他察觉到气氛不对,随口问道:「怎么了?」

「老江,遇到麻烦了,扩增曲线乱了,引物二聚体和非特异性扩增把真实信号盖住了,王教授正在想怎么调整引物结构。」

江河走过去,看了一眼之后,淡然道:「去拿一瓶dso(二甲基亚碸)过来。」

众人一愣。

王晓晴也转头看向他。

江河解释:「这套引物的gc含量在65以上,自身容易形成复杂的二级结构,这很常见,重做引物太费事了,直接在pcr的反应体系里,加入终浓度为5的dso即可。」

蔡卓群愣了一下:「dso? 有机溶剂?」

「对,dso能强效破坏碱基对之间的氢键,再把退火温度往下调15度,直接跑。」

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